Il nostro laboratorio è specializzato in tre linee di ricerca

Ruolo dell’ossigeno nei fenomeni di infiammazione, immunità innata e riparo delle ferite

Studi di patogenesi della malaria grave (malaria cerebrale, anemia severa) da Plasmodium falciparum
Studi sulle relazioni ospite parassita, tra cui studi sulla risposta immune innata a P. falciparum e i suoi prodotti (HZ), studi sull’attività immunomodulante di Leishmania spp, effetto delle co-infezioni nella patogenesi di malattie parassitarie e nello sviluppo di malattie neurologiche (Morbo di Alzheimer).
Ricerca di composti con attività antimalarica e antileishmaniosi
Studi sul meccanismo di azione dei farmaci antimalarici

Studio della patogenesi delle patologie associate a Polyomavirus umani
Studio della replicazione/riattivazione di virus nel soggetto immunodepresso
Studio del coinvolgimento dei Retrovirus Endogeni Umani nelle patologie tumorali
Messa a punto di test molecolari per la diagnosi virologica
SARS-CoV-2 e altri virus respiratori: ricerca di farmaci
SARS-CoV-2 e altri virus respiratori: implicazioni cliniche dell’infezione
Creazione di una ceppoteca, ad oggi comprendente i seguenti virus: Human Polyomavirus JC e BK (JCPyV, BKPyV), Herpes Simplex virus 1 (HSV-1), Varicella Zoster Virus (VZV), Influenza Virus, Sars-CoV-2, West Nile Virus (WNV), e Zika Virus. Tutti i virus sono utilizzabili per test farmacologici e di neutralizzazione in vitro.

Le tecniche utilizzate in laboratorio

Biologia Molecolare:

Estrazione DNA/RNA e proteine da differenti matrici, fluidi biologici e linee cellulari (mediante metodo manuale a colonnina e automatizzato)
PCR e Real Time PCR (chimica SYBR Green e TaqMan)
Elettroforesi (su gel di agarosio, bidimensionale SDS-PAGE e Western blot)
Analisi di sequenze
Tecniche di clonaggio molecolare (inserimento di costrutti/frammenti di DNA in plasmidi)
Sorting di cellule mononucleate con biglie magnetiche
Colture batteriche in terreni solidi e liquidi –isolamento e caratterizzazione specie batteriche

Biologia Cellulare:

Espansione e mantenimento di colture cellulari primarie ed immortalizzate
Co-colture per stimolazioni linfocitarie autologhe
Trasfezioni / infezioni stabili e transienti di linee cellulari
Utilizzo di geni reporter (luciferasi) in linee cellulari immortalizzate
Saggi di vitalità cellulare (saggio MTT, saggio LDH)
Separazione e conta di cellule mononucleate da sangue periferico mediante tecnica Ficoll
Saggio di tubulogenesi su matrice di collagene
Saggi di immunomodulazione, produzione citochine (ELISA)
Tecniche di imaging, immunofluorescenza

Parassitologia e Virologia:

Coltura in vitro a lungo termine di P. falciparum e di Leishmania spp.
Produzione di gametociti di P. falciparum
Saggi di chemiosensibilità su P. falciparum (stadio asessuato e gametociti) e Leishmania spp
Generazione di ceppi transgenici di Leishmania spp
Titolazione virale con metodi molecolari (qRT-PCR) e cellulari (plaque assay e TCID)
Isolamento di virus da campioni umani quali tamponi nasali, lavaggi broncoalveolari
Saggi di neutralizzazione per valutare l’attività anti-SARS-CoV-2 di sieri di pazienti